F.A.Q
BIOTOXIS (kit qPCR) : quels critères Ct valident une série quand le contrôle positif amplifie après 38 cycles ?
1 réponse
- Avec le kit qPCR BIOTOXIS, l interpretation d une amplification tardive du contrôle positif (par exemple après 38 cycles) se fait avant tout selon les critères de validation définis dans la notice (plages d acceptation dépendantes de la cible et du lot) et vos exigences qualité internes.
- Critère principal : Ct et cinétique du contrôle positif
La série est considérée valide si le Ct du contrôle positif se situe dans la plage d acceptation indiquée par la notice et si la courbe présente une cinétique attendue (forme sigmoïde exploitable). Si le Ct est hors plage, la validation de la série doit suivre la règle décrite par la notice et votre procédure (critère d acceptation ou d invalidation). - Critères transverses indispensables
Pour une validation robuste de la série, vérifier également :- NTC sans amplification (Ct non détecté) ou, si la notice le prévoit, Ct au dela du seuil de non prise en compte défini par le kit.
- Cohérence inter-réplicats et absence de profils atypiques en fin de run.
- Si une courbe étalon est utilisée : cohérence de l efficacité et de la linéarité selon vos critères et les recommandations de la méthode appliquée.
- Lorsque seul le contrôle positif est tardif
Une amplification tardive peut être liée à des paramètres de préparation ou de run (concentration, réglages de seuil/baseline, conditions de réaction). Une approche professionnelle consiste à confirmer en relançant la série selon la procédure interne : utilisation de réactifs conformes, vérification des réglages d analyse, et répétition (par exemple en double) conformément à votre plan qualité. - Application des seuils internes (exemple de règle)
Si votre SOP définit un seuil du type Ct >= 38 = indéterminé, alors un contrôle positif a Ct >= 38 se traite selon cette règle documentaire. Pour rester conforme, la décision finale doit s aligner sur la notice BIOTOXIS et votre système qualité (traçabilité, critères d acceptation, re-test).
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Postée le : vendredi 6 novembre 2026